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如何培養(yǎng)小鼠小膠質(zhì)BV2細胞?

更新更新時間:2024-11-17 瀏覽次數(shù):230

  培養(yǎng)小鼠小膠質(zhì)BV2細胞需要遵循一系列特定的步驟和注意事項,以確保細胞的健康生長和實驗的準確性。以下是培養(yǎng)BV2細胞的一般步驟:
  
  一、準備階段
  
  1、培養(yǎng)基準備:使用DMEM高糖培養(yǎng)基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-鏈霉素(P/S)。
  
  2、環(huán)境控制:確保培養(yǎng)箱內(nèi)的空氣占95%,二氧化碳濃度為5%,溫度保持在37℃。
  
  二、復蘇階段
  
  1、提前將水浴鍋預(yù)熱至37℃,培養(yǎng)基復溫至室溫或37℃,離心機設(shè)置好轉(zhuǎn)速。
  
  2、從液氮罐中取出細胞,迅速搖晃直至融化至米粒大小冰塊時終止水浴,整個過程不超過2分鐘。
  
  3、直接將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心2分鐘,棄上清,用預(yù)熱的培養(yǎng)基緩慢加入凍存管,輕柔重懸細胞后接種至培養(yǎng)瓶中。
  

小鼠小膠質(zhì)BV2細胞

 

  三、傳代階段
  
  1、輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3mL培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面吹下細胞。
  
  2、將細胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管,900rpm離心3-5分鐘,棄上清。
  
  3、加新的全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,補足全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
  
  四、凍存階段
  
  1、配制程序性凍存液,推薦配方為92%FBS+8%DMSO或92%全培養(yǎng)基+8%DMSO。
  
  2、先將細胞按傳代步驟獲得細胞沉淀,加入適量程序性凍存液輕輕重懸細胞,并將細胞懸液轉(zhuǎn)移至凍存管中。
  
  3、將凍存管放入程序性凍存盒,放入-80℃冰箱過夜,然后轉(zhuǎn)移至液氮保存并登記細胞保存位置。
  
  總之,培養(yǎng)小鼠小膠質(zhì)BV2細胞需要嚴格控制培養(yǎng)條件、及時處理細胞狀態(tài)變化,并遵循規(guī)范的操作流程。通過這些措施,可以確保BV2細胞的健康生長和實驗的順利進行。

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