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產(chǎn)品名稱:

C6 大鼠腦膠質瘤細胞/鏡像綺點(iCell)

產(chǎn)品型號: C6
產(chǎn)品時間: 2025-01-07
描述:C6 大鼠腦膠質瘤細胞/鏡像綺點(iCell)
C6 大鼠腦膠質瘤細胞介紹
膠質細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。當細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產(chǎn)量增加10倍。
1) 來源:大鼠,膠質瘤
2) 形態(tài):成纖維細胞,貼壁生長

產(chǎn)品介紹

C6 大鼠腦膠質瘤細胞/鏡像綺點(iCell)介紹

膠質細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。當細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產(chǎn)量增加10倍。

 

細胞特性

1) 來源:大鼠,膠質瘤

2) 形態(tài):成纖維細胞,貼壁生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

 (3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途:僅供科研使用。

 

C6 大鼠腦膠質瘤細胞/鏡像綺點(iCell)接收后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

                       

細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備F12K培養(yǎng)基;馬血清,15%;優(yōu)質胎牛血清,2.5%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

下面T25瓶為類;

1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹:

        一、原代細胞服務:
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
               原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務:
               細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
               細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
               細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務:
               iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎培養(yǎng)技術實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

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