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產品名稱:

NALM-6 人B淋巴白血病細胞/STR鑒定

產品型號: NALM-6
產品時間: 2024-12-20
描述:NALM-6 人B淋巴白血病細胞/STR鑒定
NALM-6 人B淋巴白血病細胞介紹
該細胞由19歲患有急性淋巴細胞白血?。ˋLL)的19歲男子的外周血建立
1)來源:外周血
2) 形態(tài):懸浮生長
3) 含量:>1x10^6 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

產品介紹

NALM-6 人B淋巴白血病細胞/STR鑒定介紹

該細胞由19歲患有急性淋巴細胞白血?。ˋLL)的19歲男子的外周血建立,在1976年復發(fā)。

細胞特性

1)來源:外周血

2) 形態(tài):懸浮生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。

(3)具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

 

細胞用途:僅供科研使用。

細胞接收后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

5)  接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。

NALM-6 人B淋巴白血病細胞/STR鑒定           

細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備RPMI Medium 1640 培養(yǎng)基;北美胎牛血清,10%;雙抗,1%;

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

5.懸浮細胞的傳代

在傳代密度1 x 106 cells/ml,細胞可在維持在1.0-2.0 x 106 cells/ml的密度生長,傳代比例為1:2至1:3,三天一次,低的傳代密度為0.5 x 106cells/ml。(seed out at ca. 1 x 106 cells/ml; maintain at 1.0-2.0 x 106 cells/ml; split ratio of 1:2 to 1:3 every 3 days; minimum density of 0.5 x 106cells/ml)

細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為例;

1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

培養(yǎng)細胞時請注意
(1)傳代時細胞的接種密度應控制在 1萬-4萬 活細胞/平方厘米。
(2)選用高質量的胎牛血清配制培養(yǎng)液。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

        一、原代細胞服務:
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
               原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務:
               細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
               細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
               細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務:
               iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎培養(yǎng)技術實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

 

序號

產品名稱

貨號

規(guī)格

售價

備注

1

培養(yǎng)基1640

icell-0002

500ml

140

 

2

培養(yǎng)基DMEM

icell-0001

500ml

140

 

3

培養(yǎng)基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

 

4

內皮細胞培養(yǎng)基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

 

5

動物上皮細胞培養(yǎng)基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

 

6

上皮細胞培養(yǎng)基Epicm

icell-0017

500ml

1980

 

7

Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基

icell-0011

500ml

160

 

8

MEM培養(yǎng)基

icell-0012

500ml

140

 

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

 

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

 

11

馬血清

gibco.16050122

500ml

1489

 

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

 

13

PBS片劑(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

 

14

PS雙抗(進口)

15140-122

100ml

452

 

15

胰蛋白酶

25200-072

500ml

665

 

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