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轉(zhuǎn)染(Transfection)是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或抑制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染有哪些類型和方法呢?1)根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時(shí)間長短,可以分為瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)。瞬轉(zhuǎn)穩(wěn)轉(zhuǎn)導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中,而是保留在細(xì)胞核上導(dǎo)入的DNA整合到基因組中導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代;遺傳改變只是暫...
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細(xì)胞培養(yǎng)基的構(gòu)成中動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長繁殖起著重要作用。在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用又是zui廣泛的,所以想要細(xì)胞在培養(yǎng)過程中長的好、穩(wěn)定,牛血清的質(zhì)量好壞直接影響生物研究的質(zhì)量和安全性,使用質(zhì)量好的牛血清也是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。血清是提供生長激素、營養(yǎng)物,以及低分子營養(yǎng)物;提供結(jié)合蛋白;能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源;起...
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養(yǎng)細(xì)胞可謂是個(gè)精細(xì)活,從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候一旦不注意,就很容易造成細(xì)胞污染,所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外,還要提前做好準(zhǔn)備:細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備1)在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺(tái),這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。2)細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)...
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在制作原代細(xì)胞免疫熒光時(shí),容易出現(xiàn)一些問題,造成熒光鑒定失敗,將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素,制成熒光抗體檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)時(shí),一定要注意抗體的比例高低和濃度。制作免疫熒光常用的方法有:方法一:直接法步驟:將熒光標(biāo)記的特異性抗體(抗原)直接加在抗原(抗體)上,經(jīng)一定的溫度和時(shí)間染色,水洗—干燥—封片—鏡檢優(yōu)點(diǎn):操作簡便、特異性高、非特異性染色少缺...
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